Analisis Kalsium atorvastatin Dengan HPTLC

ABSTRAK :

 Kalsium atorvastatin adalah inhibitor reduktase HMG-CoA selektif and ezetimibe has lipid-lowering activity. dan ezetimebe memiliki aktivitas penurun lipid. Both are potential anti-lipidae- Kedua obat tersebut digunakan dalam kombinasi untuk mengurangi jumlah kolesterol dan triglycerides in systemic circulation. trigliserida dalam sirkulasi sistemik. This paper describes a simple, precise, Makalah ini menggambarkan secara sederhana, tepat dan akurat dengan menggunakan and accurate HPTLC method for simultaneous quantification of these com- metode HPTLC untuk analisis secara kuantifikasi simultan dari komponen senyaawa sebagai obat massal dan dalam bentuk tablet dosis. Chromatographic se- Pemisahan secara kromatografi dilakukan pada pelat aluminium precoated dengan silica gel 60 F silika gel 60 F 254 254, with toluene–methanol 8:2 ( v / v ) as mobile phase. , dengan toluena-metanol 8:02 (v / v) sebagai fase gerak. Densi- Evaluasi densitoometri dilakukan pada 240 nm. The two Kedua drugs were satisfactorily resolved with R obat memiliki F nilai RF 0,23 ± 0,01 dan 0,39 ± 0,01 masing-masing values 0.23 ± 0.01 and 0.39 ± 0.01 for atorvastatin calcium and ezetimibe, respectively. untuk atorvastatin kalsium dan ezetimibe. The accuracy and re- Ketepatan liability of the method was assessed by evaluation of linearity (0.4–2.4 metode dinilai dengan evaluasi linearitas (0,4-2,4 µg/zone for both atorvastatin calcium and ezetimibe), precision (intra-day mg / zona untuk kalsium atorvastatin dan ezetimibe), presisi (intra-hari

RSD 1.16–1.25% and inter-day RSD 1.16–1.44% for atorvastatin calcium, RSD 1,16-1,25% dan antar-hari RSD 1,16-1,44% untuk kalsium atorvastatin,

and intra-day RSD 0.47–0.63% and inter-day RSD 0.47–0.88% for ezeti- dan intra-hari RSD 0,47-0,63% dan antar-hari RSD 0,47-0,88% untuk ezeti-

mibe), accuracy (98.51 ± 0.23% for atorvastatin calcium and 99.01 ± 0.15% mibe), akurasi (98,51 ± 0,23% untuk kalsium atorvastatin dan 99,01 ± 0,15%

for ezetimibe), and specificity, in accordance with ICH guidelines. untuk ezetimibe), dan spesifisitas, sesuai dengan pedoman ICH. The

Tinjauan pustaka :

Atorvastatin kalsium ([R - (R *, R *)]-( 2 - (4-fluorophenyl)-β, δ-dihidroxy-5-(1-methylethyl)-3-fenil-4-[(phenylamino) karbonil] -1 H-pirol-1-diaptanoic acid, calcium salt (2:1) trihydrate) is a synthetic lipid-lowering ptanoic asam, garam kalsium (2:1) trihidrat) adalah agen penurun lipid sintetik yang merupakan agent.It is a selective competitive inhibitor of the enzyme HMG-CoA inhibitor kompetitif selektif dari enzim HMG-CoA  reductase, which catalyses the conversion of HMG-CoA to mevalonate, reduktase, yang mengkatalisis konversi HMG-KoA untuk mevalonate,

an important rate-limiting step in cholesterol biosynthesis [1,2]. merupakan langkah penting dalam membatasi laju biosintesis kolesterol. Ezetimibe

 Ezetimibe (1-(4-fluorophenyl)-3( R )-[3-(4-fluorophenyl)-3( S )-hydroxylpropyl]-4( S )- (1 - (4-fluorophenyl) -3 (R) - [3 - (4-fluorophenyl) -3 (S)-hydroxylpropyl] -4 (S) -

(4-hydroxyphenyl)-2-azetidinone) is another lipid-lowering agent [3]. (4-hidroksifenil)-2-azetidinone) adalah agen penurun lipid. Literature review reveals that methods have been reported for ana- Tinjauan literatur mengungkapkan bahwa analysis of atorvastatin calcium by high-performance liquid chromatography lisis kalsium atorvastatin dengan KCKT (HPLC) [4–7] and high-performance thin-layer chromatography (HPTLC) (HPLC) dan HPTLC

[8], and for estimation of ezetimibe by HPLC [9], either alone or in com-dan untuk estimasi ezetimibe oleh HPLC [9], baik sendiri atau dalam com-

bination with other drugs, but no HPTLC method has yet been reported for bination dengan obat lain, tetapi ada metode HPTLC belum dilaporkan untuk

simultaneous estimation of atorvastatin calcium and ezetimibe. estimasi simultan kalsium atorvastatin dan ezetimibe. The purpo- Para purpo-

se of this research was to establish and validate, in accordance with Inter- se dari penelitian ini adalah untuk membangun dan memvalidasi, sesuai dengan Inter-

national Conference on Harmonization (ICH) guidelines [10], a simple, Konferensi nasional tentang Harmonisasi (ICH) pedoman [10], sederhana,

accurate, economical, and reproducible procedure for quantitative TLC ana- akurat, ekonomis, dan direproduksi prosedur kuantitatif KLT ana-

lysis of atorvastatin calcium and ezetimibe as the bulk drug and in tablet lisis kalsium atorvastatin dan ezetimibe sebagai obat curah dan dalam tablet

dosage forms. bentuk sediaan.

Experiment :

Kromatografi lapis tipis

Analysis was performed on 20 cm × 20 cm aluminium plates pre- Analisis dilakukan pada plat aluminium pra-dilapisi dgn silica gel 60F 254. Sebelum digunakan, pelat dicuci dengan metanol, thanol, activated in an oven at 105°C for 20 min, then left to cool at roomdiaktivasi dalam oven pada 105 ° C selama 20 menit, kemudian dibiarkan dingin pada suhu kamar.temperature. Standard solutions of atorvastatin calcium and ezetimibe (0.2 Larutan Standar kalsium atorvastatin dan ezetimibe (0,2µg µL µg/ml, 4uL) yang diterapkan untuk pra-plat yg telah diaktivasi, muncul 6-mm band,

6 mm apart, under a stream of nitrogen, by means of a Camag Linomat IV 6 mm terpisah, di bawah aliran nitrogen, dengan metode Camag Linomat IV otomatis dg aplikator band dg Hamilton 100 mikroliter. Plat dielusi dg 20 ml toluene-metanol 8:2 (v/v) sebagai fase gerak pada chamber yg sebelumnya sudah dijenuhi dg fase gerak. jarak dan waktu pengembang 15 cm selama 20 menit. plat dikeringkan dan dilakukan densitometry pada 240 nm. dengan TLC-scannercamag 3menggunakan perangkat lunak CATS 4. larutan standar dibuat kurva kalibrassi dengan konsentrasi 2,4, 6, 8, 10, dan 12 mikro dari larutan kalsium atorvastatin dan ezetimibe (0,2 mikroliter/ml) yang ditotolkan pada plat.  

RESULTS AND DISCUSSION HASIL DAN PEMBAHASAN

Tablet powder was extracted with methanol because both atorva- Tablet yang telah diserbukkan diekstraksi dengan metanol karena kedua atorvastatin calcium and ezetimibe are freely soluble in this solvent. statin dan ezetimibe kalsium secara bebas larut dalam pelarut ini. Centrifuga- sentrifugasi dilakukan selama 15 menit pada kecepatan.

. A variety of mobile phases, Berbagai fase gerak, for example chloroform–methanol, chloroform–toluene–acetic acid, and ben- misalnya kloroform-metanol, kloroform-toluena-asam asetat, dan ben-

zene–methanol–toluene mixtures, were investigated for separation of ator- zene-metanol-toluena campuran, yang diselidiki untuk pemisahan ator-

vastatin calcium and ezetimibe from their impurities and from excipients vastatin kalsium dan ezetimibe dari kotoran mereka dan dari eksipien

in the formulation. dalam formulasi. Toluene–methanol 8:2 ( v / v ) was found to result in the Toluena-metanol 8:02 (v / v) ditemukan mengakibatkan

best peak shape. munculny puncak terbaik. Atorvastatin calcium and ezetimibe were satisfactorily re- Atorvastatin kalsium dan ezetimibe masing masing menghasilkan nilai RF solved with R 0,23 ± 0,01 dan 0,39 ± 0,01, (Gambar 2).

Densitogram obtained from atorvastatin calcium and ezetimibe Densitogram diperoleh dari kalsium atorvastatin dan ezetimibe

As recommended by International Conference on Harmonization Seperti yang direkomendasikan oleh Konferensi Internasional tentang Harmonisasi

(ICH) [10], calibration plots were established for atorvastatin calcium and (ICH) [10], plot kalibrasi didirikan untuk kalsium atorvastatin dan

ezetimibe standards using six concentrations (0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0, and 2.4 ezetimibe standar menggunakan enam konsentrasi (0,4, 0,8, 1,2, 1,6, 2,0, dan 2,4

µg per band). ug per band). The correlation coefficients for the plots were 0.9995 for ator- Koefisien korelasi yg dihasilkan untuk plot-plot adalah 0,9995 untuk ator-

vastatin calcium and 0.9999 for ezetimibe. vastatin kalsium dan 0,9999 untuk ezetimibe. Results from the recovery study Hasil dari studi pemulihan

indicated the method enabled accurate quantification of the drugs in the menunjukkan metode kuantifikasi akurat dalam analisis obat dalam tablet dosage form (Table III). bentuk sediaan tablet (Tabel III).

The intra-day and inter-day relative standard deviations were in the Deviasi intra-hari dan antar-hari standar relatif ranges 1.16–1.25% and 1.16–1.44% for atorvastatin calcium and 0.47–0.63% berkisar 1,16-1,25% dan 1,16-1,44% untuk kalsium atorvastatin dan 0,47-0,63% and 0.47–0.88% for ezetimibe. dan 0,47-0,88% untuk ezetimibe. These small values indicate the method is Nilai-nilai kecil menunjukkan metode ini precise. yang tepat. Relative standard deviation ( RSD ) for measurement of peak area Relatif standar deviasi (RSD) untuk pengukuran daerah puncak was 1.02% and 1.76% for atorvastatin calcium and ezetimibe, respective- adalah 1,02% dan 1,76% untuk kalsium atorvastatin dan ezetimibe, masing-

ly, and RSD for repeatability of sample application was 1.50% and 0.61% ly, dan RSD untuk pengulangan dari aplikasi sampel 1,50% dan 0,61%

for atorvastatin calcium and ezetimibe, respectively. RSD for measurement untuk atorvastatin kalsium dan ezetimibe, masing-masing. RSD untuk pengukuran

of peak area and sample application were better than the specifications of daerah puncak dan contoh aplikasi yang lebih baik dari spesifikasi

the instrument, indicating proper functioning of the TLC system. instrumen, yang menunjukkan berfungsinya sistem KLT. To con- Untuk menguji kekhususan metode, kalsium atorvastatin dan ezetimibe re applied to a TLC plate and developed and scanned as described above. kembali diterapkan pada pelat KLT dan dikembangkan dan dipindai seperti dijelaskan di atas.

Excipients present in the formulation did not interfere with the peaks of Eksipien hadir dalam formulasi tidak mengganggu puncak

atorvastatin calcium and ezetimibe. atorvastatin kalsium dan ezetimibe. The spectra acquired for atorvastatin Spektrum yang diperoleh untuk atorvastatin

calcium and ezetimibe extracted from the tablet were also compared with kalsium dan ezetimibe diekstrak dari tablet juga dibandingkan dengan

those acquired from atorvastatin calcium and ezetimibe standards; correla- yang diperoleh dari kalsium atorvastatin dan standar ezetimibe; korelasi

tion was good. tion bagus. When small changes were made to the method conditions Ketika perubahan kecil yang dilakukan pada kondisi metode

there were no marked changes in chromatographic behaviour, indicating tidak ada perubahan dalam perilaku ditandai kromatografi, menunjukkan

the method is robust. metode ini kuat.

CONCLUSION KESIMPULAN

It is shown above that the new TLC–densitometric method achie- Hal ini ditunjukkan di atas bahwa metode KLT-densitometri baru achie-

ved accuracy, reproducibility, repeatability, linearity, and selectivity that Ved akurasi, reproduktifitas, keterulangan, linieritas, dan selektivitas yang

compares favourably with those of HPLC, HPTLC, spectrophotometry, and lebih baik dibandingkan dengan orang-orang dari HPLC, HPTLC, spektrofotometri, dan

other methods reported regularly in the literature. metode lain dilaporkan secara teratur dalam literatur. The results also meet Hasil juga bertemu

ICH guidelines [11,12] for validation of pharmaceutical TLC methods. Pedoman ICH [11,12] untuk validasi metode KLT farmasi.

The proposed TLC method is less expensive, simpler, more rapid, and Metode TLC yang diusulkan lebih murah, sederhana, lebih cepat, dan

more flexible than HPLC. lebih fleksibel daripada HPLC.

ACKNOWLEDGEMENTS